產(chǎn)品描述

貨號(hào)：520045  

英文名：microTUBE AFA Fiber Pre-Slit Snap-Cap 6x16mm (25)  

中文名：微管AFA纖維預(yù)切口卡扣蓋6x16mm（25支裝）  

品牌：Covaris  

規(guī)格：25個(gè)/包  

適用場景：DNA/RNA片段化、染色質(zhì)剪切（ChIP實(shí)驗(yàn)）、低起始量樣本處理（如單細(xì)胞或微量組織）。  

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 精準(zhǔn)片段化  

  • 基于AFA技術(shù)，通過高頻短波長（1 MHz）聲波聚焦，實(shí)現(xiàn)DNA/RNA片段化長度可控，重復(fù)性高（CV<5%）。  

  • 支持非接觸式處理，避免交叉污染，減少樣本損失。  

2. 等溫處理  

  • 水浴恒溫系統(tǒng)（默認(rèn)20°C）確保實(shí)驗(yàn)過程中溫度波動(dòng)≤±2°C，保護(hù)熱敏感樣本的完整性。  

3. 高兼容性  

  • 適配微量樣本（13–300 μl），尤其適用于FFPE組織、單細(xì)胞或低起始量的染色質(zhì)剪切。  

  • 兼容Covaris SonoLab軟件，支持自定義參數(shù)設(shè)置。  

4. 耐用性與安全性  

  • 卡扣蓋設(shè)計(jì)防止液體泄漏，透明管體便于實(shí)時(shí)觀察。  

  • 耐化學(xué)腐蝕，可反復(fù)使用。  

儲(chǔ)存條件

• 環(huán)境：常溫（15–25°C），避免高溫（>30°C）或低溫（<5°C）。  

• 濕度：相對(duì)濕度≤60%，遠(yuǎn)離陽光直射及潮濕環(huán)境。  

• 保質(zhì)期：未開封狀態(tài)下保質(zhì)期1年，開封后建議6個(gè)月內(nèi)使用完畢。  

工作原理

1. AFA技術(shù)核心  

  • 通過壓電陶瓷換能器將電能轉(zhuǎn)化為高頻聲波（1 MHz），聚焦于樣本區(qū)域，產(chǎn)生瞬時(shí)高壓（>50 MPa）導(dǎo)致核酸鏈斷裂。  

  • 能量密度和占空比可調(diào)節(jié)，控制片段化程度。例如：  

    ? DNA剪切：典型參數(shù)為200 W功率、20%占空比、200次循環(huán)/爆發(fā)，處理時(shí)間30秒。  

    ? 染色質(zhì)剪切：低功率（55 W）、低占空比（5%），避免組蛋白修飾酶失活。  

2. 樣本處理流程  

  • 離心預(yù)處理：樣本需離心（3000×g，30秒）去除氣泡，確保均勻分布。  

  • 水浴恒溫：將微管置于水浴槽中，通過循環(huán)水維持溫度穩(wěn)定。  

  • 超聲處理：儀器自動(dòng)控制聲波聚焦位置與時(shí)間，生成目標(biāo)片段。  

解決實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵問題

1. 片段化不均  

  • 傳統(tǒng)超聲或酶切法易導(dǎo)致片段大小分布寬泛，AFA技術(shù)通過精準(zhǔn)能量控制實(shí)現(xiàn)單分散性片段。  

2. 交叉污染風(fēng)險(xiǎn)  

  • 非接觸式處理避免樣本間污染，尤其適用于病原體檢測或臨床樣本分析。  

3. 熱損傷  

  • 等溫條件保護(hù)DNA/RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)及蛋白質(zhì)表位，適用于ChIP-seq等下游應(yīng)用。  

4. 低起始量樣本處理  

  • 支持微量樣本的片段化，減少因樣本量不足導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失敗。  

使用方法

步驟1：樣本準(zhǔn)備  

• 樣本類型：基因組DNA、FFPE提取的DNA、染色質(zhì)、RNA等。  

• 體積要求：13–300 μl（推薦130–150 μl），濃度≥50 ng/μl。  

步驟2：安裝微管  

1. 將microTUBE插入Holder XTU的卡槽中。  

2. 確保管體與Holder緊密貼合，避免超聲過程中移位。  

步驟3：設(shè)置參數(shù)  

• 軟件設(shè)置：通過SonoLab軟件選擇預(yù)設(shè)程序，或自定義參數(shù)：  

 • 功率：55–200 W（根據(jù)樣本類型調(diào)整）。  

 • 占空比：5–20%。  

 • 循環(huán)次數(shù)：100–500次。  

• 水浴溫度：默認(rèn)20°C，可手動(dòng)調(diào)節(jié)至15–25°C。  

步驟4：運(yùn)行程序  

• 啟動(dòng)超聲處理，儀器自動(dòng)記錄能量輸出與時(shí)間。  

• 處理完成后，取出微管并離心（3000×g，30秒）去除殘留液滴。  

步驟5：質(zhì)量檢測  

• 使用Agilent 2100 Bioanalyzer或High Sensitivity DNA Kit驗(yàn)證片段分布。  

常見問題與解決方案

問題1：片段大小偏離預(yù)期  

• 原因：參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤、樣本純度不足。  

• 解決：校準(zhǔn)儀器能量輸出，純化樣本。  

問題2：樣本污染  

• 原因：Holder未清潔或卡扣蓋密封不嚴(yán)。  

• 解決：每次實(shí)驗(yàn)后使用70%乙醇擦拭Holder，更換新卡扣蓋。  

問題3：微管破裂  

• 原因：過度離心或機(jī)械撞擊。  

• 解決：避免高速離心（>5000×g），輕拿輕放。  

問題4：儀器報(bào)錯(cuò)“水位不足"  

• 原因：水浴槽水位過低或傳感器堵塞。  

• 解決：補(bǔ)充水至MAX線，清潔水位探頭。  

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