自動聲波聚焦技術(Adaptive Focused Acoustics®,AFA)是一種先進的聲學技術,通過聚焦超聲實現樣品的機械處理。AFA技術可以將組織、細胞等勻漿破碎成微米甚至納米級大小的顆粒,充分破碎細胞、細胞器、膜結構,大量充分有效的釋放目的分子,提高得率,并保證生物大分子完整性,這是樣本制備的重要環節。
Covaris自動聲波聚焦(AFA®)技術工作原理是什么黑科技?
AFA技術的樣品處理是通過精確控制封閉在樣品容器內數百萬個空化氣泡的產生和崩塌來完成的。AFA 電子設備實現了超聲聲能的聚焦脈沖。這些聲學過程是在等溫、非接觸的環境中進行的——水浴維持樣品溫度,只有匯聚的聲能進入樣品容器。
超高頻電子設備產生只有幾毫米波長的聲波,這使得超聲聲能能夠匯聚到浸沒在水浴中的樣品容器內的焦點區域。穿過水浴的聲能會引起局部壓力波動,從而形成空化氣泡。由AFA產生的空化氣泡會振蕩或生長到臨界尺寸,然后崩塌,從而在樣品中產生流體剪切應力。空化氣泡的振蕩和崩塌還會產生聲學微流,從而在樣品中產生整體流體流動。
通過調節峰值入射功率、持續時間和占空比,可以控制微流和/或流體剪切力的產生。Covaris聚焦超聲系統有多種換能器配置,能夠實現在聲學焦點區域內對單個樣品或多個樣品進行并行處理。
高頻聲學
AFA技術提供高頻超聲聲能,其聲學范圍與醫學應用(如診斷成像和超聲)相同。
AFA技術具有短聲學波長:
短聲學波長能夠實現聲能的緊密聚焦。
AFA技術是聚焦的:
聲能匯聚到焦點區域,提高了向樣品傳遞能量的效率。傳遞給樣品的總熱量更少。
AFA技術可實現溫度控制:
在樣品內聚焦的能量傳遞過程能夠破壞容器內的熱邊界層,從而實現精密的溫度控制。
聚焦超聲儀與探頭式/水浴式超聲儀
普通的探頭式和水浴式超聲儀的工作頻率為10到30 kHz,處于可聽(聲)頻率范圍的邊緣。在這種頻率下,波長大約為100 mm,大于典型的樣品容器(約10到100 mm),因此無法被控制并聚焦到樣品容器中。這也是普通超聲儀聲音很大的原因!
此外,由于樣品、容器和水浴聲學耦合劑都處于壓力場中,普通超聲儀的非聚焦聲能并不會迅速消散,幾乎沒有熱差可以將熱量從樣品中驅散,結果是超聲過程能量轉化為緩慢消散的熱能,這對于易變性、熱敏感的生物分子尤其有害。非聚焦、分散的低頻聲能導致效率降低,因此需要更多的聲能才能產生空化事件。多余的熱量影響樣品,導致熱分子損傷和樣品處理不均勻。此外,探頭式超聲儀還直接接觸樣品,引入了污染的風險。
AFA更具可重復性,因為聲能以非接觸、高度聚焦的方式傳遞,消除了熱損傷或污染的風險。AFA可實現高質量、高回收率、快速的樣品制備。
AFA技術應用
AFA 技術以其在NGS中剪切DNA和RNA而聞名,并正在為核酸和蛋白質的FFPE提取、cfDNA提取、表觀基因組學、蛋白質組學、細胞裂解等領域樹立新的標準。在從難以處理的樣品中提取生物分子時,AFA 技術可以與干式低溫研磨相結合,使用 cryoPREP 干式研磨儀,在下游處理之前以比當前方法(如研缽和杵)更高效的方式處理樣品。將 Covaris 整合到您的工作流程中,可以實現完整的、高質量的樣品制備解決方案。
AFA技術常用耗材
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